一、SPE回收率低的主要原因

1. 目標物未被有效保留（載入時流失）

柱的選擇與目標物極性/性質(zhì)不匹配（如用C18柱萃取極性很強的物質(zhì)，導致直接流失）。

柱平衡不徹底（活性位點未被激活，保留能力下降）。

載樣時樣品強溶劑或體積過大，目標物無法與固定相作用被直接沖走。

2. 目標物在洗滌或漂洗步驟丟失

洗脫劑或洗滌劑的極性過強，把目標物一同洗脫（如用含有機溶劑的洗滌液而目標物極性較強）。

洗滌步方法不當（體積太大或濃度不合適）。

3. 目標物未能完全從固定相洗脫（殘留在柱上）

洗脫溶劑極性或強度不夠，目標物洗脫不徹底。

溶劑選擇不合適，沒有破壞目標物與固定相之間的作用力。

4. 目標物在處理過程中降解或轉(zhuǎn)化

pH不當，導致目標物結(jié)構(gòu)變化或分解。

樣品長時間暴露在高溫、氧化環(huán)境下，導致部分降解。

5. 柱容量不夠或柱污染

目標物量太多，超出固定相容量。

固定相因污染、堵塞、重復使用，吸附能力下降。

6. 其他機械損失

轉(zhuǎn)移樣品時殘留、吸附在管壁、耗材上。

干燥/濃縮步驟揮發(fā)損失。

二、常見診斷與解決思路

問題表現(xiàn) 主要原因 解決辦法

上樣后幾乎測不到目標物 固定相選擇不當/上樣溶液太強 換合適的固定相或優(yōu)化上樣溶劑及動力學

洗脫后目標物含量明顯降低、峰消失 洗滌液帶出目標物/洗脫不徹底 優(yōu)化洗滌液強度/選擇更強的洗脫劑/調(diào)整洗脫體積

目標物濃縮干燥后回收率低 揮發(fā)、降解/管壁吸附 控溫緩慢濃縮/用惰性氣體吹干/管壁加保護劑，減少暴露時間

小分子極易流失 上樣體積大、溶劑極性強 調(diào)整樣品稀釋度、必要時預處理樣品

三、優(yōu)化建議

選擇合適的SPE固定相和類型

根據(jù)目標化合物極性（極性/非極性/離子交換/特殊功能基團）進行選擇。

做平行實驗優(yōu)化固定相。

樣品溶劑與體積處理

上樣前用少量純水/流動相稀釋樣品，降低有機溶劑比例。

控制上樣體積，盡量保證目標物有時間與固定相充分結(jié)合。

嚴格優(yōu)化洗滌/洗脫條件

洗滌液不宜太強，防止目標物流失，可分步增加有機相比例直至剛好不流失目標物。

洗脫劑要足夠強，能夠準確、高效解吸目標物。

柱平衡和活化要充分

通常：有機相潤濕 → 水活化 → 進樣，操作過程中每一步都應(yīng)使用足夠體積通欄。

樣品處理溫度和pH控制

嚴格控制pH在目標物穩(wěn)定區(qū)間，盡量在低溫避光條件下操作。

濃縮與轉(zhuǎn)移注意防損失

盡量避免樣品濃縮至完全干燥，或分步轉(zhuǎn)移可加洗。

若目標物極易吸附，可在收集液加保護劑或表面活性劑。

四、簡單排查方法

在上樣液、洗滌液、洗脫液分別測定目標物含量，溯源丟失步驟。

用標準品做回收率測試和空白試驗，判定是否有降解、吸附等非特異性損失。