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動物源性食品中克倫特羅等3種β-受體激動劑殘留檢測

（Polyclean X-MCX）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為動物源性食品(動物肌肉和肝臟)中克倫特羅(clenbuterol)、沙丁胺醇(salbutamol)、萊克多巴胺(ractompamine)等3種β-受體激動劑的樣本前處理凈化方法，

HPLC法作為檢測手段。Polyclean X-MCX (60mg/3mL)柱凈化效果良好，回收率滿足測試要求，重現(xiàn)性好，與知名廠商同型號柱性能相當。

二、實驗目標物

克倫特羅(CAS:37148-27-9)、沙丁胺醇(CAS:18559-94-9)、萊克多巴胺(CAS:97825-25-7)。

三、應用范圍

本方法適用于動物源性食品(動物肌肉和肝臟)中克倫特羅(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、萊克多巴胺(Rac)等3種β-受體激動劑殘留藥物的檢測。

四、參考標準

《GB/T22286-2008   動物性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》

五、實驗材料

NuAnalytical Polyclean X-MCX固相萃取柱60mg/3mL，W品牌MCX固相萃取柱60m

g/3mL。

六、實驗方法

1、樣品待測溶液制備

稱取2±0.01 g經(jīng)搗碎的豬肉樣品，于50 mL離心管中，加8 mL乙酸鈉緩沖液(0.2 mo

l/L，pH5.2)，振蕩提取15min，4000 r/min離心10min，取上清液4 mL于50 mL離心管中，并加入0.1 mol/L高氯酸溶液5 mL，混合均勻，用高氯酸調(diào)節(jié)pH到1±0.3。4000 r/mi

n離心10min后將全部上清液轉(zhuǎn)移到50mL離心管中，用10mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH到11。加入10mL飽和氯化鈉和10mL異丙醇-乙酸乙酯(6:4,v/v)混合溶液，充分提取5 min，在4000r/ min離心10 min。

轉(zhuǎn)移全部有機相，在40 ℃水浴下氮吹干。加入5 mL乙酸鈉緩沖液(0.2 mol/L，pH5.2)，超聲混勻，使殘渣充分溶解后備用。。

2、活化

依次用3 mL甲醇和3 mL水活化。

3、上樣和洗脫

取上述殘渣溶液上柱，控制流速0.5 mL/min。后依次用2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2

mL甲醇淋洗柱子并抽干，最后用2 mL5%氨化甲醇溶液洗脫柱子上的待測成分。

4、重新溶解

收集洗脫液，于40℃氮氣吹干，準確加入1.0 mL 0.1%甲酸/水-甲醇(95:5，v/v)溶液溶解殘余物，0.22 μm濾膜過濾，供HPLC測定。

5、HPLC條件

色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)

檢測器：UV@ 249 nm，熒光激發(fā)波長226nm，發(fā)射波長306nm

柱溫：30℃    流速：1.0mL/min           進樣量：20μL

流動相：A:甲醇      B:0.1%甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫，梯度條件如下：

時間/min	A/%	B/%
0.0	10	90
8.0	48	52
15.0	48	52
15.1	10	90
22.0	10	90

七、實驗結(jié)果

1、添加水平為1.0 mg/kg豬肉基質(zhì)中克倫特羅(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、萊克多巴胺(Rac)等3

種β-受體激動劑的添加回收結(jié)果

表1  添加水平為1.0mg/kg豬肉基質(zhì)中3種β-受體激動劑的添加回收結(jié)果

回收率（%）

名稱	1	2	3	平均回收率（%）	RSD（%）
克倫特羅	85.0	88.4	89.4	87.6	2.6
沙丁胺醇	84.4	85.4	88.2	86.0	2.3
萊克多巴胺	85.0	86.6	88.4	86.7	2.0

表2   W品牌同型號柱，添加水平為1.0mg/kg豬肉基質(zhì)中3種β-受體激動劑的添加回收結(jié)果

	回收率（%）
名稱			平均回收率（%）
	1	2
克倫特羅	79.9	78.4	79.2
沙丁胺醇	86.4	84.6	85.5
萊克多巴胺	86.9	81.8	84.4